中国神经再生研究(英文版) ›› 2022, Vol. 17 ›› Issue (3): 577-586.doi: 10.4103/1673-5374.314326
Wei Tang1, Zong-Duo Guo1, Wei-Na Chai1, Dong-Lin Du1, Xiao-Min Yang1, Lang Cao2, Hong Chen1, Chao Zhou1, Chong-Jie Cheng1, Xiao-Chuan Sun1, Zhi-Jian Huang1, *, Jian-Jun Zhong1, *
摘要:
miR-491-5p在调节细胞增殖和迁移中起着重要的作用,但关于其在调节创伤性脑损伤后血管新生的作用却未见报道。(1)实验构建了C57BL/6小鼠控制性皮质损伤模型,并利用小鼠脑微血管内皮细胞构建氧糖剥夺细胞模型;(2)在体内实验中,通过qRT-PCR检测发现在小鼠侧脑室注射miR-491-5p agomir或antagomir能使小鼠创伤性脑损伤后脑组织中miR-491-5p的表达增加或降低,且miR-491-5p的表达在创伤性脑损伤后轻微下调;(3)为探究miR-491-5p在创伤性脑损伤后的神经保护作用,通过神经功能缺损评分、莫氏水迷宫实验、激光散斑技术和免疫荧光染色发现,下调miR-491-5p的表达,见创伤性脑损伤后神经运动功能恢复和创伤周围脑血流恢复,增加lectin阳染的微血管数量和神经元的存活数量;(4)体外实验中,为探究miR-491-5p对调节血管新生的机制,实验通过qRT-PCR检测发现在脑微血管内皮细胞内转染miR-491-5p mimic或inhibitor能使miR-491-5p的表达增加或降低,双荧光素酶实验和Western blot检测证实金属硫蛋白2是miR-491-5p的靶基因,通过CCK-8实验、流式细胞仪和DCFH-DA探针法检测发现,下调miR-491-5p能够增加氧糖剥夺干预后脑微血管内皮细胞活力,减轻氧糖剥夺干预后的脑微血管内皮细胞的凋亡和氧化应激反应;通过细胞划痕实验、Transwell实验、管腔形成实验和Western blot实验检测发现,下调miR-491-5p能够通过金属硫蛋白2依赖性缺氧诱导因子1α/血管内皮生长因子通路促进脑微血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成;(5)上述数据证实,下调miR-491-5p的表达能够促进创伤性脑损伤后新生血管的形成,脑血流恢复和神经功能的恢复,激活金属硫蛋白2依赖性缺氧诱导因子1α/血管内皮生长因子通路和减轻氧化应激是实现其作用的可能机制。
https://orcid.org/0000-0002-8241-0761 (Zhi-Jian Huang); https://orcid.org/0000-0002-9481-5088 (Jian-Jun Zhong)
中图分类号: