中国神经再生研究(英文版) ›› 2021, Vol. 16 ›› Issue (7): 1317-1322.doi: 10.4103/1673-5374.301034
Rui-Lin Zhu1, 2, Yuan Fang3, Hong-Hua Yu2, 4, Dong F. Chen2, Liu Yang1, *, Kin-Sang Cho2, *
摘要:
在哺乳动物中,Müller细胞(MC)被认为是休眠的视网膜祖细胞。以往研究表明,ephrin-A充当视网膜和大脑中神经祖细胞的负调节剂。尚不清楚缺乏ephrin-A2/A3是否足以促进Müller细胞的神经再生潜力。(2)实验研究了ephrin-A2/A3对Müller细胞神经再生潜力的影响。结果显示ephrin-A2/A3及其受体EphA4在视网膜中表达,尤其是在Müller细胞中富集。随着视网膜的成熟,ephrinAs/EphA4的表达水平增加,这与Müller细胞增殖和祖细胞潜能的降低有关。(2)实验应用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)掺入法检测了野生型和A2 -/- A3 -/-小鼠中提取的原代Müller细胞培养物的增殖。在A2 -/- A3 -/-小鼠的Müller细胞中检测到EdU+细胞数量明显增加。(3)为了进一步评估ephrin-A2/A3在体内MC增殖中的作用,给予成年野生型, A2 -/- A3 -/- , Rho -/-,Rho -/- A2 -/- A3 -/- 小鼠腹腔注射EdU,在视网膜切片上定量分析各视网膜层EdU+细胞的数量。发现与野生型小鼠相比,Rho-/-小鼠视网膜中的EphrinAs/EphA4表达上调。此外,与野生型小鼠相比,从ephrin-A2 -/- A3 -/-小鼠获得的Müller细胞也表达更高水平的祖细胞标记物水平。(4)成年ephrin-A2 -/- A3 -/-小鼠视网膜中EdU+细胞明显增加。并且这些EdU+细胞与Müller细胞标志物细胞视黄醛结合蛋白共定位,表明某些增殖细胞来自于Müller细胞。在视紫红质基因敲除Rho -/- A2 -/- A3 -/-小鼠中,发现位于睫状体、视网膜和视网膜色素上皮细胞中的EdU+细胞数量明显多于Rho-/-小鼠。(5)通过对比6-12周龄Rho -/- A2 -/- A3 -/-小鼠,发现在严重视网膜变性的12周龄小鼠的外核层中存在更多的EdU+细胞。(6)总之,Ephrin-A2和Ephrin -A3是Müller细胞增殖和神经再生的负调节剂。缺乏ephrin-A2和-A3会促进增殖细胞向外核层迁移,从而提高视网膜神经再生潜力。
https://orcid.org/0000-0003-4285-615X (Kin-Sang Cho);
https://orcid.org/0000-0003-4450-8642 (Liu Yang)