1 实验设计构思介绍
近年来的研究表明，糖尿病各种慢性并发症的发生、发展不仅与整体（持续）血糖水平相关，而且与血糖的波动性（稳定性）密切相关，“波动性高血糖”危害比“稳定性高血糖”更大。因此，血糖的过度波动对靶器官的损伤和并发症的危险性成为糖尿病慢性并发症研究的新热点。糖尿病周围神经病变是糖尿病最常见的慢性并发症之一，其发病机制尚未完全阐明，近年来Brownlee 提出的糖尿病并发症的氧化应激统一机制学说备受关注。目前对于波动性高血糖通过氧化应激通路诱导周围神经细胞凋亡的损害的研究少有报道。本研究通过检测DNA 氧化损伤产物、活性氧、细胞凋亡信号转导通路中重要基因表达的变化探讨抗氧化作用和抑制凋亡作用的内在联系，并对中药人参皂苷Rb1对波动性高血糖通过氧化应激通路诱导周围神经细胞凋亡的干预及其分子机制进行研究。
2 国内外同类研究水平的介绍
国内外同类研究显示，体内高血糖状态将导致氧化应激反应增加，而持续性与波动性高糖均可刺激ROS的过度生成导致细胞凋亡的增加,波动性高糖的作用更为显著。Verzola等发现糖尿病时ROS的产生要早于细胞凋亡。高糖环境可诱导神经元、胶质细胞以及血管内皮细胞等神经组织相关细胞的凋亡，其中由ROS所致的氧化应激反应是诱导细胞凋亡信号转导的重要原因。有研究表明在STZ-DM大鼠的背根神经节内8-OHdG显著增多，提示其发生了氧化损伤。Shanthi等通过动物实验证实了糖尿病周围神经病变时ROS增加使Bcl-2表达抑制，而Bax表达未受影响。坐骨神经的退行性变、纤维再生障碍及脱髓鞘等也与Bcl-2密切相关。以上研究表明氧化应激反应诱导的细胞凋亡可能是DPN发病的重要机制，抗细胞氧化损伤以及抗细胞凋亡有可能成为DPN防治的有效途径和靶点。许多单方或复方中药具有抗氧化的作用，可为DPN的治疗有较好的疗效，如灯盏花素、水飞蓟素、丹参酚酸、葛根素、桑叶总黄酮、加味补肝汤等。人参皂苷Rb1是传统中药人参的主要活性成分之一，现代药理学研究表明其可以通过抑制细胞凋亡、抗氧化发挥对心肌、血管内皮以及神经细胞的保护作用。
3 与其他同类研究的比较
目前国内研究多以氧化应激的中间产物（如丙二醛等）或抗氧化酶类等间接手段作为评价指标，未能直接反应组织细胞氧化应激损伤的程度，且现有的研究未能揭示中药抗氧化应激与防止细胞凋亡两者内在联系的本质，还有待完善和补充。本研究通过检测DNA 氧化损伤产物8-OHdG、ROS、细胞凋亡信号转导通路中重要基因Bcl-2/Bax表达的变化探讨抗氧化作用和抑制凋亡作用的内在联系，并对中药人参皂苷Rb1对波动性高血糖通过氧化应激通路诱导许旺细胞凋亡的干预及其分子机制进行了研究，较同类研究更为深入。
4 专家意见与答疑
专家意见：不同浓度葡萄糖造成高糖损伤模型的实验条件选择依据？应标出参考文献。
作者答疑：以往在应用高糖制造许旺细胞损伤模型的研究中，研究者采用的葡萄糖浓度从30-150 mM不等，我们的前期实验发现用50mM葡萄糖培养许旺细胞48小时即可造成细胞损伤并明显抑制其增殖，所以本研究选择此浓度作为高糖条件。
