1 本文实验设计构思介绍
针刺大椎、百会、人中三穴对MCAO大鼠进行治疗,然后利用蛋白芯片技术研究针刺对缺血性损伤脑组织保护过程中相关信号转导通路上的多种蛋白质翻译后修饰,探讨针刺对缺血损伤脑组织保护过程中可能涉及的多途经、多通路,综合分析得出与脑组织保护关系最为密切的通路。再采用蛋白组学的研究方法,探讨针刺大椎、百会、人中三穴参与缺血损伤脑组织保护过程的机理。本研究从蛋白芯片的结果出发,选择进一步探讨的方向、有的放矢,避免了以往根据文献记载选择检测指标的盲目性和不确定性。从宏观到微观、从涉及的信号转导通路到通路具体的作用机制,揭示了针刺大椎、百会、人中三穴对MCAO大鼠缺血性损伤脑组织的保护过程。
2 国内外同类研究水平的介绍
蛋白芯片可以用于筛选疾病标志物,肿瘤发生发展机制研究,药物作用靶点研究,蛋白功能研究[1-2],信号通路的筛选[3]等等方面。
[1]Yalcin A,Clem B,et al.Nuclear Targeting of 6-Phosphofructo-2-Kinase (PFKFB3) Increases Proliferation via Cyclin-dependent Kinases[J]. Journal of Biological Chemistry,2009,284:24223-24232.
[2]Kang S,Elf S,et al.p90 Ribosomal S6 Kinase 2 Promotes Invasion and Metastasis of Human Head and Neck Squamous Cell Carcinoma Cells[J].Journal of Clinical Investigation,2010,120(4):1165-1177.
[3]He H,Zong Y,et al.Sensing the Insulin Signaling Pathway with an Antibody Array[J].Proteomics Clinical Applications,2009,3:1440–1450.
3 本文与其他同类研究的比较
本文利用蛋白芯片技术对缺血脑损伤脑保护过程中可能发挥作用的蛋白通路进行侦测筛选。其他关于针刺对缺血损伤脑组织作用机制的研究,大多是通过某几个关键蛋白或某条信号通路来进行研究。本实验用蛋白芯片技术筛选出可能在脑保护过程中发挥作用的通路,加以论证,与其他研究相比,更为全面的揭示了其可能存在的保护机制和作用途径。
4 文章国内外研究状况的微观分析
近年来,随着针灸治疗缺血性脑血管病取得良好疗效,关于针灸治疗该病的机理研究也日渐深入,以往研究多从从几个蛋白或单一信号通路角度进行探讨, 尚未从总体高度探讨针刺对脑组织蛋白的变化信息,针灸效应的实现到底是通过怎样的途径以及有怎样的特异性物质发生了相应的变化还不清楚,亦鲜有相关文献报道。
5 文章创新性的分析
本研究利用蛋白芯片技术检测与脑缺血相关的多个凋亡蛋白表达的变化,观察针刺治疗后的脑组织损伤修复相关信号蛋白磷酸化的变化,筛选出各组差异性表达的蛋白并初步归属相关信号转导通路,进一步探讨 “病变在脑,首取督脉”之说,丰富经脉-脏腑相关理论,从而为缺血性脑血管病介入针刺治疗提供更深层次的实验依据。
针刺大椎、百会、人中(穴)促缺血性脑损伤修复过程中激活多种功能类型蛋白,对机体的多种生理功能进行调节;多条信号转导通路的激活,可对缺血性脑损伤的修复实现多靶点、多途径与多条信号的调整,该作用特点符合针刺“综合性”调整作用的基本特点。采用蛋白芯片技术观察脑组织蛋白表达的变化,探讨针刺对机体的整体调节作用,对阐释中医整体观的认识具有一定的促进作用。