1   稿件内容介绍
内吗啡肽( endomorphins， EMs) 是新发现的一种阿片样四肽， EMs 有两种： 内吗啡肽- 1( EM- 1) 和内吗啡肽- 2( EM- 2)。它们有特异性的结构，对Mu 阿片受体有很高的亲和力，被认为是 Mu 阿片受体的内源性配体。EM- 1和 EM- 2不仅参与镇痛、心血管、胃肠、内分泌等功能的调节，也参与对免疫功能的调节。文献报道EM- 1和EM- 2在巨噬细胞/单核细胞中被检测到，它们不仅参与炎症反应，还可改变腹腔巨噬细胞的功能。
树突状细胞(dendritic cells，DC)是目前发现的功能最强大的专职抗原递呈细胞(antigen presentingcells，APC)，参与抗原的摄取、加工及提呈。DC 最大的特点是能够显著刺激处女型或初始型 T 细胞(naive T cells)增殖， 因此 DC 是机体免疫反应的始动者，在诱导免疫应答过程中具有独特的地位。DC 的一个重要的功能就是指导 T 淋巴细胞的活化和增殖， 引导获得性免疫的发展。DC除了单纯的抗原捕获、递呈和对 T 细胞的协同刺激作用外，在特异性激活幼稚T 细胞， 联结天然免疫和获得性免疫反应中也起着独一无二的作用。
尽管有很多的证据提示DC在免疫反应中的作用， 但 DC 是否产生内吗啡肽，内吗啡肽对DC免疫功能是否有影响，国内外尚未见报道。本研究应用免疫荧光双标染色观察 EM- 1 和 EM- 2是否在树突状细胞表达，应用酶免疫测定(enzyme immunoassay，EIA)的方法，检测培养树突状细胞上清液中的内吗啡肽-1和内吗啡肽- 2 的含量，研究不同的 Toll样受体的配体对树突状细胞分泌 EM 的影响；用氚标记胸腺嘧啶核苷(3H- TdR) 参入测定的方法检测 T 淋巴细胞的增殖能力，研究内吗啡肽对DC免疫功能的调节作用。
实验结果显示活化的树突状细胞可诱导内吗啡肽的表达， DC 生成的 EMs 能分泌到上清液中， 这提示EMs 可以作为免疫调节因素， 作用于邻近的其他细胞， 发挥免疫调节作用。由于 DC自身也表达 Mu 受体因此，DC 分泌的 EMs 有可能作用于自身的 Mu 受体，以自分泌和旁分泌的方式发挥免疫调节作用。在 DC 上发现有 EMs 和 Mu 受体的诱导性表达，具有重要的生物学意义。 设想在炎症早期，DC的渗入和参与，胞质中的蛋白前体在 Toll 样受体的配体作用下生成 EMs ，随着 DC 的成熟，可以迁移至外周免疫组织和一些特异的器官(如发炎的滑膜组织)， 在组织中， EM- 1 和 EM- 2 被转运和释放， 作用于邻近的其他细胞。 成熟的 DC 提供给T细胞的，不仅是抗原特异性的刺激信号和一系列的共刺激的分子，也释放了一些可以使 T 细胞分化的细胞因子和其他化学因子，除了T 细胞，释放的 EM- 1和 EM- 2 也可以作用在巨噬细胞，抑制促炎介质的释放。总之，我们可以合理的推测，DC 释放的 EM- 1 和EM- 2 可以调节先天的和适应性的免疫应答。 此外，DC 可以迁移至有炎症的组织，DC 分泌的 EM- 1 和EM- 2 可以作用在初级传入的伤害性神经元的末端，通过抑制 P 物质和降钙素基因相关肽的产生来发挥强效的镇痛效应。
2   本文实验设计构思介绍
内吗啡肽( endomorphins， EMs) 是新发现的一种阿片样四肽，对Mu 阿片受体有很高的亲和力，被认为是 Mu 阿片受体的内源性配体。文献报道EM- 1和EM- 2在一些免疫细胞（巨噬细胞、单核细胞等）表达，它们不仅参与炎症反应，还可改变腹腔巨噬细胞的功能。树突状细胞(dendritic cells，DC)是目前发现的功能最强大的专职抗原递呈细胞，内吗啡肽是否在DC表达，对DC免疫功能是否有影响，国内外尚未见报道。本研究应用免疫荧光双标染色观察 EM- 1 和 EM- 2在树突状细胞的表达，应用酶免疫测定的方法，检测培养树突状细胞上清液中的EM- 1 和 EM- 2的含量，研究不同的 Toll样受体的配体对树突状细胞分泌 EM 的影响；用氚标记胸腺嘧啶核苷参入测定的方法检测 T 淋巴细胞的增殖能力，研究内吗啡肽对DC免疫功能的调节作用。
3   国内外同类研究水平的介绍
有关树突状细胞的研究是目前国内外研究热点，但内吗啡肽对树突状细胞的免疫调制作用尚未见文献报道。
4   文章创新点
①首次证明了活化的树突状细胞产生并分泌EM-1和EM-2。提示EMs 可以作为免疫调节因素，以自分泌和旁分泌的方式发挥免疫调节作用。扩展了我们对于内阿片肽在免疫系统分布的认识，也提示了它们在调控神经内分泌免疫调制和镇痛方面的作用。
②实验，首次报道 EMs 处理后的 DC 对 T 细胞增殖具有抑制效应。提示 EM- 1 和 EM- 2 可能抑制了 DC 对 T 淋巴细胞的激活作用，推测EM- 1 和 EM- 2 可以通过影响 DC 、巨噬细胞等的免疫功能，调节先天的和适应性的免疫应答。