中国神经再生研究(英文版) ›› 2021, Vol. 16 ›› Issue (10): 2086-2092.doi: 10.4103/1673-5374.308098
神经变性和再生标志物:检测人脑脊髓液中凝血酶和活化蛋白C的新型高灵敏度方法
Alexandra Gerasimov1, Valery Golderman2, Shany Guly Gofrit1, Shay Anat Aharoni1, Daniela Noa Zohar1, Ze’ev Itsekson-Hayosh1, Tsviya Fay-Karmon1, 3, Sharon Hassin-Baer1, 2, 3, 4, Joab Chapman1, 2, 4, 5, 6, Nicola Maggio1, 2, 4, 7, Efrat Shavit-Stein1, 2 *#br#
摘要:
凝血酶是一种促凝丝氨酸蛋白酶,与神经退行性疾病有关,而其间接抑制剂活化蛋白C(aPC)被认为具有神经保护作用。虽然在血液中可检测到凝血酶和aPC活性的水平,但该指标在脑脊髓液(CSF)中的测定尚需探讨。为建立一种特异性和灵敏的酶促法测定CSF中的凝血酶和aPC活性,(1)以10例疑似常压性脑积水(NPH)患者CSF作为对照组,而7例中枢神经系统(CNS)感染的患者作为急性神经炎研究组和1例创伤性腰椎穿刺后的CSF样本( LP)作为阳性对照组。在存在内肽酶和氨基肽酶抑制剂的情况下,通过特异性蛋白水解切割释放的荧光来检测凝血酶和aPC活性,以确保其特异性。凝血酶和丝氨酸蛋白酶抑制剂NAPAP和PMSF验证了该方法的特异性;(2)评估了CSF对凝血酶活性的抑制作用和特定凝血酶抑制剂的水平。与NPH对照相比,CNS感染患者的CSF中的凝血酶和aPC活性明显更高,表明这些因素参与了神经炎症。在存在已知凝血酶浓度的情况下,CNS感染患者的CSF凝血酶活性水平较高,而NPH患者则较低;(3)Western印迹检测CSF中内源性凝血酶抑制剂蛋白酶nexin 1(PN1)、淀粉样前体蛋白(APP)和抗凝血酶III(ATIII)水平显示,APP在感染性CSF中显着升高;(4)该研究找到了一种新颖且灵敏的方法用于检测脑脊液中凝血酶和aPC的活性,有助于反映凝血与神经系统神经变性与再生的关系。
https://orcid.org/0000-0003-3373-8397 (Efrat Shavit-Stein)
中图分类号: