中国神经再生研究(英文版) ›› 2020, Vol. 15 ›› Issue (3): 464-472.doi: 10.4103/1673-5374.266058
Yan Yang1, 2, Gen Ye1, 3, Yue-Lin Zhang1, Hai-Wei He1, Bao-Qi Yu4, Yi-Mei Hong1, Wei You1, Xin Li1
摘要:
神经元中线粒体功能障碍与缺氧缺血诱导的脑损伤有关。越来越多的证据表明,间充质干细胞已成为治疗缺氧缺血诱导的脑损伤的一种新型疗法,但其潜在机制尚未完阐明。(1)首先将1.5×105个PC12细胞与诱导多能干细胞来源的间充质干细胞以1:1比例共培养,然后用氯化钴干预24h。以Mito-sox测量PC12细胞的活性氧水平,以JC-1染色测量PC12细胞线粒体膜电位,以TUNEL染色分析PC12细胞的凋亡情况,以透射电镜评估PC12细胞中的线粒体形态,以流式细胞术测量线粒体从诱导多能干细胞来源的间充质干细胞向受损PC12细胞的转移情况。(2)以含有线粒体中含有绿色荧光蛋白的慢病毒感染诱导多能干细胞来源的间充质干细胞,然后将其与PC12细胞于Transwell小室中共同培养,用氯化钴干预24h。以检测PC12细胞ATP的水平。(3)结果显示,氯化钴诱导的PC12细胞损伤呈剂量依赖性。氯化钴干预后,与诱导多能干细胞来源的间充质干细胞共培养可显著减少PC12细胞的凋亡并恢复受损PC12细胞中线粒体膜电位。同时与诱导多能干细胞来源的间充质干细胞共培养,也能明显改善受损PC12细胞中线粒体肿胀、嵴消失和染色质深染的现象。而PC12细胞与诱导多能干细胞来源的间充质干细胞直接共培养后,2种细胞间可见隧道纳米管,且线粒体通过隧道纳米管在细胞间转移。氯化钴能显著提升线粒体转移的效率。而通过细胞松弛素D抑制隧道纳米管形成,可部分抑制诱导多能干细胞来源的间充质干细胞对氯化钴诱导的PC12细胞损伤的有益作用。(4)提示诱导多能干细胞来源的间充质干细胞对氯化钴诱导的PC12细胞损伤的改善作用,部分归因于线粒体的转移。
orcid: 0000-0003-0469-5121 (Xin Li)