1.Lingguizhugan decoction inhibits overexpression of interleukin-1β, interleukin-6, tumor necrosis factor-α and nitric oxide in activated BV-2 microglia in a dose-dependent manner. 2.Lingguizhugan decoction protects a human neuroblastoma cell line (SH-SY5Y) against amyloid-β peptide (25–35)-induced injury 1.苓桂术甘汤可剂量依赖性地抑制小胶质细胞活化后炎性因子白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α及一氧化氮的过表达。 2.苓桂术甘汤可保护β-淀粉样蛋白25-35损伤的人神经母细胞瘤细胞。

1    本文实验设计构思介绍
阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD) 又称老年性痴呆，是以进行性记忆障碍和智能衰退为主要临床特征的中枢神经系统退行性疾病。根据国际阿尔茨海默病组织(Alzheimer Disease International，ADI)的报导，到2010年，全世界AD患者超过3500万，比2005年增加了将近10%，而且，ADI还指出AD的患病率将每20年翻一番。老龄化是AD的重要发病因素，据统计，发达国家老年人AD的患病率高达6.7%，65岁以后年龄每增长5岁发病率将翻倍[1]，85岁或更大年龄时，患病率高达40%[2]。Zhang等[3]2005年在北京、上海、成都、西安4个主要城市进行痴呆患病率调查，结果表明65岁以上老年人AD患病率男性为3.4%，女性为7.7%，总患病率为5.9%。在发达国家AD已成为继癌症、心脏病和卒中之后的第4位死亡原因，有人预计，二十一世纪AD将成为引起人类死亡的首要病因。我国是目前世界上老龄化速度最快的国家，随着老龄人口的逐年增加，AD必将成为一个严重的社会问题和经济问题。因此，如何有效防治本病已成为医学界关注的重要课题之一。
AD病因及发病机制复杂，大量研究显示，本病的发生与年龄、性别、遗传等多种因素的综合作用有关，因此学者们从不同角度提出了多种学说，如基因学说、胆碱能学说、自由基损伤学说、炎症学说、内分泌学说等。在众多假说中，炎症机制假说占有重要的地位，而且随着研究的深入，逐渐成为AD研究的焦点。目前大多数学者认为Aβ沉积激活小胶质细胞(microglia，MG)引起的炎性反应是AD的核心病理机制。对于本病目前尚无特效的治疗方法，西医主要是对症治疗，药物昂贵且毒副作用较大，不符合老年人用药的要求。中医学对AD的病因病机有其独特的认识，并在长期的临床实践中积累了丰富的治疗经验。中药复方具有多靶点多效性的特点，毒副作用相对较低，其治疗AD的优势被越来越多的研究者所重视。
中医学对老年性痴呆的认识较早，在各类医籍中，将本病分别列在“白痴”、“呆病”、“呆痴”、“痴呆”、“神呆”、“愚痴”等病症中论述。对于本病的病因病机，许多医家都认为与痰饮密切相关。 “痰积于脑中，盘踞于心外，使神明不清而成呆病矣。”(陈士铎《辨证录》) “呆病如痴，默默不言，悠悠如失……皆由痰气结成。”(赵学敏《串雅•内编》) “百病多由痰作祟”，痰饮是神志病发病中最常见的病邪，痰饮停留体内，一则蒙蔽心窍，使神机失用，精神错乱，如痴如呆；二则阻遏清阳，使脑髓失养，心神失主，发为痴呆。
苓桂术甘汤出自《伤寒杂病论》，是治疗痰饮病的基础方剂，广泛应用于临床多种与痰饮相关疾病的治疗。方中茯苓味甘淡性平，为利水渗湿、健脾化痰之要药，《世补斋医书》谓“茯苓一味，为治痰主药。”《神农本草经》称其“久服安魂养神，不饥延年”。现代研究也证明茯苓尤其是其主要成分茯苓多糖有抗衰老、抗炎等作用。桂枝温通经脉、利水散饮，《本草再新》载其亦有“健脾燥胃”之功。现代研究表明桂枝挥发油的主要成分桂皮醛有明显的抗炎作用。白术健脾补气、燥湿化痰，《神农本草经》将其列为上品，言其“久服轻身，延年，不饥”。实验研究表明白术能清除自由基，抗氧化、抗衰老，还可增强人体的免疫功能。甘草健脾补气、调和诸药。研究表明甘草中的多种成分与老年性痴呆的防治有密切关系，甘草黄酮类成分有抗衰老作用，其对脂质过氧化终产物丙二醛的生成具有明显抑制作用，对超氧离子自由基和经自由基有明显的清除作用；甘草酸类成分有显著的抗炎作用和免疫调节作用。
苓桂术甘汤有健脾益气，温化痰饮之功，痰饮去，则神明清；苓桂术甘汤有抗炎之效，炎症消，则意志用。因此，无论是中医理论，还是药效研究，都说明苓桂术甘汤可能对AD有较好的防治作用。但从查阅的文献看，目前对此领域的研究鲜有报道。本研究借助细胞生物学和分子生物学手段，体外观察苓桂术甘汤对AD细胞模型的保护作用和抗炎作用，为苓桂术甘汤治疗AD提供初步的实验依据，以期进一步丰富和完善中医药治疗老年性痴呆的方法和手段。
2    内外同类研究水平的介绍
国内外同类研究较少探讨苓桂术甘汤治疗AD的效应及其机制。而温化痰饮法治疗AD效应机制的研究亦属首次。
3    本文与其他同类研究的比较
    国内外同类研究较少探讨苓桂术甘汤治疗AD的效应及其机制。而温化痰饮法治疗AD效应机制的研究亦属首次。
4    本文先进性
自2010.3至2010.8间检索PUBMed、Web of Sci、CNKI、维普等数据库，就AD、痰饮、苓桂术甘汤、茯苓、桂枝、白术、甘草等内容展开文献检索，共检出近400篇文章。经过文献检索及详细阅览，发现国内外同类研究较少探讨苓桂术甘汤治疗AD的效应及其机制。而温化痰饮法治疗AD效应机制的研究亦属首次。
5    专家意见与答疑
专家意见1：采用苓桂术甘汤直接加入培养细胞的方法观察中药药效不宜提倡。另外检测手段过于单一，易出现假阳性结果。
作者答疑：实验中采用的是苓桂术甘汤水提液。同时有预实验就该方治疗大鼠AD模型的效应机制进行探讨，前期已就该方部分效应机制开展了研究。因此本实验中以苓桂术甘汤水提液——此种最符合中医制剂规律、最易溶于细胞培养液的方法观察该方在细胞水平治疗AD的效应机制。
专家意见2：宜分析或比较他人的研究结果或相关药物对该模型相关指标的研究结论。
作者答疑：本文探讨的是中医温化痰饮的方苓桂术甘汤治疗AD的效应及其机制，并非立足于AD模型及病理机制的探讨。因此，在文章撰写时所围绕的仅仅是选取AD细胞水平的病理模型从而探讨中医温化痰饮治法的依据。所以在分析时，没有与其它相关研究结果的对比。