1 实验设计构思介绍
①AD作为一种年龄相关性的神经元病，其在更年期女性中较高的发病率引起了人们的重视，既往的研究已表明体内雌激素水平的变化与AD的发生密切相关，同时多项对于雌激素替代治疗后的研究肯定了雌激素对神经系统的保护作用，但绝经后雌激素水平的变化是如何影响AD的发病？ 雌激素替代治疗后如何实现在AD中的保护作用？这些机制尚未明确。我们注意到海马结构区的细胞凋亡是AD的主要病理变化之一，同时海马结构又是雌激素的重要靶器官—海马区的神经元有着密集的雌激素受体分布，因此我们联想到雌激素很可能是通过作用于海马结构区的神经元而产生对AD发病的调控及神经保护作用。
②目前随着雌激素替代疗法防治绝经后相关疾病研究的深入，雌激素长期应用导致肿瘤性疾病增加使其临床应用受到限制，这可能与目前常用雌激素替代治疗为动物雌激素有关，动物雌激素多与ERα亲和力高，而后者在子宫、乳腺和卵巢等内分泌器官表达占优势，通过刺激如子宫、卵巢和乳腺等靶器官的细胞增生诱导肿瘤发生，人们呼吁新的较少副作用的雌激素替代品的出现。而植物雌激素有着与动物雌激素相似的作用却有这较少的副作用，因此被人们寄予希望可成为新的雌激素替代治疗药物，然而目前植物雌激素在防治AD方面应用的研究较少，而对于染料木素对于去卵巢大鼠海马神经元凋亡的研究国内外尚未见文献报道。
③为此我们实验采用了去卵巢大鼠模型，其具有绝经后妇女类似的雌激素水平变化，也有类似绝经后全身多系统衰老的表现，是一种较好的绝经动物模型，观察其在去卵巢后海马神经元凋亡的变化情况，观察并比较植物雌激素Genistein和17β-雌二醇对去卵巢大鼠海马结构内神经元凋亡影响，并同时检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达变化来探讨其可能的作用机制。
2 国内外同类研究水平的介绍
目前国内外关于植物雌激素（染料木素）对绝经后相关疾病的防治以及对女性内分泌生殖系统肿瘤的研究较多，主要研究方面为植物雌激素对相应细胞上的雌激素受体（ER）的调节作用及细胞内信号传导、肿瘤基因表达、细胞凋亡调控等方面，对于植物雌激素对神经系统变性疾病（AD）较少，而对于染料木素在去卵巢大鼠模型中的海马神经元凋亡的影响尚未见文献报。
3 与其他同类研究的比较
采用去卵巢大鼠模型模拟女性绝经后生理性雌激素变化，观察雌激素水平变化对海马神经元凋亡的影响，并观察并比较植物雌激素Genistein和17β-雌二醇对去卵巢大鼠海马结构内神经元凋亡影响，同时检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达变化表达来探讨其可能的作用机制，旨在进一步揭示激素水平变化与AD发病关联的机制，同时为植物雌激素在AD防治中的应用提供更多的证据。
4 先进性、创新性及其特色
采用去卵巢大鼠作为女性绝经后模型，观察并比较植物雌激素Genistein和17β-雌二醇对去卵巢大鼠海马结构内神经元凋亡影响，同时检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化表达来探讨其可能的作用机制，同时为植物雌激素在AD防治中的应用提供更多证据
检索数据库，检索时间，检索时间范围，检索关键词，检索出相关文章数量及验证说明：
①中国期刊全文数据库 2000-01-01/2012-02-28
关键词：（阿尔茨海默病或AD）并且（染料木素或genestein）并且（海马或海马结构） 2篇
关键词：（去卵巢大鼠）并且（染料木素或genestein）并且（海马或海马结构） 1篇
②万方数据资源系统 1998/2012.
关键词：（阿尔茨海默病或AD）并且（染料木素或genestein）并且（海马或海马结构） 0篇
关键词：（去卵巢大鼠）并且（染料木素或genestein）并且（海马或海马结构） 0篇
③Pubmed 2000-01-01/2012-02-28
关键词： (("Alzheimer's disease" or "ovariectomized rats"[MeSH Terms]) AND genestein[MeSH Terms]) AND hippocampus[MeSH Terms] 5篇
5 文章国内外研究状况的微观分析
目前国内外关于植物雌激素（染料木素）对绝经后相关疾病的防治以及对女性内分泌生殖系统肿瘤的研究较多，主要研究方面为植物雌激素对相应细胞上的雌激素受体（ER）的调节作用及细胞内信号传导、肿瘤基因表达、细胞凋亡调控等方面，对于植物雌激素对神经系统变性疾病（AD）较少，而对于染料木素在去卵巢大鼠模型中的海马神经元凋亡的影响尚未见文献报。
6 染料木素的纯度与干预剂量的依据
染料木素的纯度为98.5%。
既往Hertrampf等的研究[1]表明2.5-10mg/kgBW剂量（腹腔注射给药）即是比较适宜的有效剂量，并且子宫重量增加等副作用较小；Fanti P等[2]对去卵巢大鼠骨质疏松一项研究中采用5mg/kgBW水平的genestein干预即取得了较好的干预效果，因此为了尽量模拟大鼠生理溶度水平的雌激素水平，并避免植物雌激素剂量较大可能带来的子宫及体重增加的副作用，同时与相应剂量的雌激素替代治疗更具可比性，我们采取了较低溶度剂量(5mg/kgBW）的Genestein干预溶度;2008年中山大学Shi C等在一项对于去卵巢大鼠神经元细胞线粒体功能采用的Genestein干预（50μL, 25%g/L，genistein solution)，按该实验中大鼠体重换算后大约为5mgkgBW），并取得较好的干预效果，也进一步证明了5mgkgBW水平的genestein干预是较为合适的水平；目前有采用较高溶度的genestein神经保护作用的研究报道，并显示在一定溶度范围内成剂量-效果相关性，这提示我们可以在下一步的研究中采用不同剂量genestein进行干预，以进一步比较不同剂量genestein的带来的影响，为其在AD的防治中采取合适的剂量的提供实验依据。
[1]Hertrampf T, Schmidt S, Laudenbach-Leschowsky U, et al.Tissue-specific modulation of cyclooxygenase-2 (Cox-2) expression in the uterus and the v. cava by estrogens and hytoestrogens.Mol Cell Endocrinol. 2005 Nov 24;243(1-2):51-7.
[2]Fanti P, Monier-Faugere MC, Geng Z, et al. The phytoestrogen genisteinreduces bone loss in short-term ovariectomized rats J . Osteoporos Int, 1998，8: 274-281.
[3]Shi C, Xu XW, Forster EL, et al.Possible role of mitochondrial dysfunction in central eurodegeneration of ovariectomized rats.Cell Biochem Funct. 2008 Mar-Apr;26(2):172-8.
