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专家意见：
作者研究了 OECs, SCs，AECs，ECs四种细胞共培养条件下GDNF, BDNF及NGF分泌水平的变化，培养基中加入脑脊液对上述细胞共培养情况下GDNF，BDNF及NGF水平的影响。上述四类细胞单独培养可以分泌上述营养因子，尤其是OECs及SCs，所以作者通过四种细胞共培养的目的不明，研究目标不明确，为了促进营养因子的表达？还是同时高表达？没有对照，无法说明此问题。加入脑脊液的目的是希望模拟神经细胞代谢的内环境？加入浓度过高，导致营养因子表达减少，原因？从四类细胞生长曲线看，SCs增殖明显 高于其余各类，在共培养中，以10：10：1：1的比例，依据是什么?SCs增殖快，比例高，培养第9天时，整个培养皿中是否全部是Scs，其余细胞的比例占多少。图表形式欠自明性，图和表中数据重复。图表说明不清楚。此种细胞比例和脊髓损伤后细胞移植有何关系？作者也没有做体内移植的实验，文中前沿部分所提问题与研究内容联系不够密切。
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作者回复：
四种细胞共培养的目的源于最初的广东省科技计划项目中的人工细胞小境的制备部分内容，本实验最初的开题为“细胞小境的制备和功能检测”, 脊髓损伤（SCI）一般分为原发性损伤与继发性损伤两个阶段。本实验计划研究从改变SCI后损伤区域NTFs的缺乏这一方面来促进损伤修复可能，制备一个“人工细胞小境”。细胞小境的囊用人工硬脑膜制备，贴近脊髓的内壁为特殊加工能透过神经生长因子及酶类大分子但不能透过细胞的人工硬脑膜，多种细胞在细胞小境的囊中培养，脑脊液自由通过小境内壁为细胞提供营养物质，而细胞分泌的各种NTFs则透过半透膜来改变SCI后的NTFs缺乏的环境。人工硬脑膜的孔径及材料已经制备好，但多细胞培养条件的探索暂时在培养皿中进行。四种细胞共培养目的是希望发挥每种细胞分泌NTFs的累积效应，达到各种NTFs分泌均衡。加入脑脊液是为了模拟“人工细胞小境”囊内的细胞的外环境。试验中又发现完全单纯脑脊液条件下四种细胞均难以存活，显微镜下形态结果观察显示当脑脊液在30%及以下比例时细胞生长未见明显异常。试验中以共培养不同时间（每隔3天）作对照，验证四种细胞共培养产生稳定的NTFs分泌效应，从而纠正SCI后的NTFs缺乏的环境。采用20%及30%比例脑脊液对照，验证脑脊液比例增高对NTFs分泌的抑制作用。关于共培养四种细胞的比例安排，则是考虑前两种细胞（OECs及SCs）为分泌NTFs的主要细胞，所以细胞所占比例较另外两种多。四种细胞均有接触抑制现象（细胞长满互相接触时不再继续增殖），在实验条件的细胞比例及细胞浓度下第3天细胞几乎即长满底壁。至于培养第9天时，培养皿中各种细胞所占比例，是研究之外的内容。图和表及说明会做进一步修改。动物体内移植实验是后续试验，尚未进行。
专家意见：材料中为什么只设计所加的培养基中只含30%和20%的CSF的培养基，应当说明，另外需要以只含CSF的或不加CSF的完全培养基作为对照，以说明含CSF或不含CSF对实验结果的影响。
作者回复：加入脑脊液是为了模拟移植细胞体内生长的外环境。实验发现完全单纯CSF条件下四种细胞在联合培养3天之内均死亡，在文章讨论部分提及，显微镜下形态结果观察显示在脑脊液在30%及以下比例时细胞生长未见明显异常。试验中以共培养不同时间（每隔3天）作对照，验证四种细胞共培养产生稳定的NTFs分泌效应，从而纠正SCI后的NTFs缺乏的环境。采用20%及30%比例脑脊液对照，以及100%比例CSF条件下细胞生长停滞甚至死亡，验证脑脊液比例增高对NTFs分泌的抑制作用。
