清除巨噬细胞联合许旺细胞移植减小脊髓挫伤后囊肿的体积

doi:10.4103/1673-5374.230295

摘要/Abstract

摘要：

许旺细胞移植是治疗脊髓损伤（SCI）的有前景的疗法，目前正在进行的临床试验正在验证其治疗效果。由于巨噬细胞是脊髓损伤部位重要的效应细胞，是受损脊髓急性炎症环境的主要贡献者，实验假设在巨噬细胞清除后移植许旺细胞有利于提高细胞存活率，并促进其与宿主组织的整合。为了验证这一假设，实验建立脊髓T8中度挫伤大鼠模型，然后随机给予或不给予腹腔注射氯膦酸二钠脂质体以清除巨噬细胞，并于脊髓挫伤后1周移植许旺细胞。T5节段腰髓注射生物素化葡聚糖胺（BDA）以评估轴突再生。以BBB运动测试、Gridwalk测试和评估感觉功能的Von Frey纤维丝测痛仪评估大鼠功能恢复情况。采用免疫组织化学染色法检测脊髓囊肿和病变体积、许旺细胞存活，以及生物素化葡聚糖胺阳性轴突的数量。在脊髓损伤后8周，巨噬细胞清除联合许旺细胞移植组大鼠脊髓囊肿和病变体积比单独许旺细胞移植组明显减小。然而，这些变化与许旺细胞存活、轴突生长或运动恢复的改善无关。由此说明虽然许旺细胞移植联合巨噬细胞清除确实改善了脊髓挫伤的病理损害，但是促进轴突生长和行为恢复的表现并不比单独移植许旺细胞效果好。

关键词: 神经再生, 许旺细胞, 轴突再生, 细胞存活, 运动功能, 感觉功能, 囊肿, 细胞移植

Abstract:

Schwann cell transplantation is a promising therapy for the treatment of spinal cord injury (SCI) and is currently in clinical trials. In our continuing efforts to improve Schwann cell transplantation strategies,we sought to determine the combined effects of Schwann cell transplantation with macrophage depletion. Since macrophages are major inflammatory contributors to the acute spinal cord injury, and are the major phagocytic cells, we hypothesized that transplanting Schwann cells after macrophage depletion will improve cell survival and integration with host tissue after SCI. To test this hypothesis, rat models of contusive SCI at thoracic level 8 were randomly subjected to macrophage depletion or not. In rat subjected to macrophage depletion, liposomes filled with clodronate were intraperitoneally injected at 1, 3, 6, 11, and 18 days post injury. Rats not subjected to macrophage depletion were intraperitoneally injected with liposomes filled with phosphate buffered saline. Schwann cells were transplanted 1 week post injury in all rats.Biotinylated dextran amine (BDA) was injected at thoracic level 5 to evalute axon regeneration. The Basso,Beattie, and Bresnahan locomotor test, Gridwalk test, and sensory test using von Frey filaments were performed to assess functional recovery. Immunohistochemistry was used to detect glial fibrillary acidic protein, neurofilament, and green fluorescent protein (GFP), and also to visulize BDA-labelled axons. The GFP labeled Schwann cell and cyst and lesion volumes were quantified using stained slides. The numbers of BDA-positive axons were also quantified. At 8 weeks after Schwann cell transplantation, there was a significant reduction in cyst and lesion volumes in the combined treatment group compared to Schwann cell transplantation alone. These changes were not associated, however, with improved Schwann cell survival,axon growth, or locomotor recovery. Although combining Schwann cell transplantation with macrophage depletion does improve histopathology of the injury site, the effect on axon growth and behavioral recovery appears no better than what can be achieved with Schwann cell transplants alone

Key words: Schwann cell, liposome, clodrosome, clodronate, axon regeneration, Schwann cell survival, neuroprotection, glial scar, cyst, cell transplantation

. 清除巨噬细胞联合许旺细胞移植减小脊髓挫伤后囊肿的体积[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2018, 13(4): 684-691.

Yee-Shuan Lee, Lucy H. Funk, Jae K. Lee, Mary Bartlett Bunge. Macrophage depletion and Schwann cell transplantation reduce cyst size after rat contusive spinal cord injury[J]. Neural Regeneration Research, 2018, 13(4): 684-691.

参考文献

引言

出版重点

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延伸阅读

Neural Regen Res：清除巨噬细胞与许旺细胞移植是治疗脊髓损伤更好的选择吗？

许旺细胞移植治疗亚急性脊髓损伤的效果已得到许多动物实验的证实，其临床应用的安全性也已于2015年美国迈阿密项目完成的I期临床试验得以证实；同样的，伊朗和中国也获得了其临床应用安全性证据。

尽管许旺细胞移植在SCI治疗方面很有前途，但许旺细胞移植后的体内存活和与宿主组织的整合仍是值得研究的问题。许旺细胞单独移植在缩小囊肿大小和促进损伤部位轴突再生方面表现出了优势。同时，由于巨噬细胞是脊髓损伤部位重要的效应细胞，是受损脊髓急性炎症环境的主要贡献者，美国迈阿密米勒医学院的Yee-Shuan Lee等假设在巨噬细胞清除后移植许旺细胞有利于提高细胞存活率，并促进其与宿主组织的整合。

Lee等的实验建立脊髓T8中度挫伤大鼠模型，然后随机给予或不给予其腹腔注射氯膦酸二钠脂质体以清除巨噬细胞，并于脊髓挫伤后1周移植许旺细胞。在脊髓损伤后8周，巨噬细胞清除联合许旺细胞移植组大鼠脊髓囊肿和病变体积比单独许旺细胞移植组明显减小。然而，这些变化与许旺细胞存活、轴突生长或运动恢复的改善无关。由此说明虽然许旺细胞移植联合巨噬细胞清除确实改善了脊髓挫伤的病理损害，但是对轴突生长和行为恢复的促进并不比单独的许旺细胞移植好。基于这些结果，作者认为清除巨噬细胞联合许旺细胞移植在治疗脊髓挫伤方面效果并不优于单独单独的许旺细胞移植。

上述研究结果发表于《中国神经再生研究（英文版）》杂志2018年第4期。

Article: "Macrophage depletion and Schwann cell transplantation reduce cyst size after rat contusive spinal cord injury" by Yee-Shuan Lee1, Lucy H. Funk1, Jae K. Lee1, 2, Mary Bartlett Bunge1, 2, 3 (1 The Miami Project to Cure Paralysis, University of Miami Miller School of Medicine, Miami, FL, USA; 2 Department of Neurological Surgery, University of Miami Miller School of Medicine, Miami, FL, USA; 3 Department of Cell Biology, University of Miami Miller School of Medicine, Miami, FL, USA)

Lee YS, Funk LH, Lee JK, Bunge MB (2018) Macrophage depletion and Schwann cell transplantation reduce cyst size after rat contusive spinal cord injury. Neural Regen Res 13(4):684-691.

[1]	. ISP和PAP4有助于恢复周围神经损伤后运动功能的恢复[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2021, 16(8): 1598-1605.
[2]	. 蝶翅应用于临床组织工程化神经移植材料的生物相容性和安全性[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2021, 16(8): 1606-1612.
[3]	. 神经基质膜包裹周围神经损伤的安全和有效性：一项随机单盲多中心临床试验[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2021, 16(8): 1652-1659.
[4]	. 经颅脉冲电刺激可改善脑卒中大鼠的运动功能[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2021, 16(7): 1229-1234.
[5]	. 体感和运动诱发电位可反映单侧颈部脊髓挫伤后粗大和精细运动的功能[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2021, 16(7): 1323-1330.
[6]	. 抗坏血酸加速周围神经损伤后的Wallerian变性[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2021, 16(6): 1078-1085.
[7]	. 有助于低渗诱导许旺细胞中ATP释放的细胞大孔径膜通道Pannexin 1 [J]. 中国神经再生研究(英文版), 2021, 16(5): 899-904.
[8]	. 创伤性脑损伤仔猪模型中预测性MRI生物标志物的鉴定[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2021, 16(2): 338-344.
[9]	. 山楂叶总黄酮可抑制脊髓损伤后的细胞凋亡并促进运动功能恢复[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2021, 16(2): 350-356.
[10]	. 敲除Krüppel样因子4基因可促进哺乳动物轴突再生？[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2021, 16(1): 166-171.
[11]	. CXCR7中和抗体对脑缺血慢性期海马齿状回神经再生认知功能的影响[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2020, 15(6): 1079-1085.
[12]	. 追踪神经再生轴突时程分析体内感觉轴突的再生[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2020, 15(6): 1160-1165.
[13]	. 幼年氯胺酮暴露诱导大脑海马神经元凋亡可影响成年空间学习能力[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2020, 15(5): 880-886.
[14]	. 血清胱抑素C水平与缺血性脑卒中后认知功能障碍呈负相关[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2020, 15(5): 922-928.
[15]	. Slit1-3和Robo1-2在小鼠损伤周围神经系统中的动态表达[J]. 中国神经再生研究(英文版), 2020, 15(5): 948-958.