中国神经再生研究(英文版) ›› 2020, Vol. 15 ›› Issue (5): 948-958.doi: 10.4103/1673-5374.268930
Bing Chen1, Lauren Carr2, Xin-Peng Dun2, 3
摘要:
轴突引导因子Slit是一种排斥性指导分子,可通过与Robo受体相互作用,在神经系统发育中起到精确引导轴突生长和神经元迁移的作用。作者所在团队既往研究显示Slit1-3及其受体Robo1和Robo2在成年小鼠周围神经系统中高表达,但是这些因子在损伤周围神经系统中的表达变化尚未得到很好的研究。因此,实验通过横断小鼠右侧坐骨神经构建周围神经损伤模型,在损伤后14d内,以实时反转录PCR检测L4-L5脊髓、L4-L5背根神经节和坐骨神经中Slit1,Slit2,Slit3,Robo1和Robo2 mRNA表达,以免疫组化分析L4-5脊髓、L4背根神经节和坐骨神经中Slit1,Slit2,Slit3,Robo1,Robo2,神经丝重链、F4/80和波形蛋白的免疫阳性反应,以原位杂交检测L4背根神经节中Slit1-3和Robo1-2的共表达情况,以Western blot检测L4-5脊髓、L4背根神经节和坐骨神经中Slit1,Slit2,Slit3,Robo1,Robo2的表达水平。结果显示,(1)脊髓中Slit1-3和Robo1-2 mRNA表达在损伤后14d内均未出现明显变化;(2)背根神经节中Slit1-3和Robo1-2 mRNA在损伤后4d内下调,但Robo1-2 mRNA在损伤后14d时能恢复至正常水平,而Slit1-3 mRNA表达则在损伤后4-14d时明显上调;(3) 在损伤后14d内,坐骨神经中Slit1-3及其受体Robo1和Robo2均在近端神经残端中表达,而神经桥和神经远端残端中未见Slit1,Slit2和Robo2表达,Slit3在神经桥周围的巨噬细胞中高表达,但在神经远端残端中略微下调。Robo1在神经桥波形蛋白阳性细胞和迁移许旺细胞中表达上调,也在神经远端残端的许旺细胞中上调;(4)结果表明,Slit3是周围神经再生过程中神经桥和神经远端残端表达的主要配体,Slit3/Robo信号通路在损伤后周围神经修复中起关键作用。实验于2014年4月12日由普利茅斯大学动物福利和伦理审查委员会批准(项目许可证号: 30/3203)。
orcid: 0000-0002-7042-8614 (Bing Chen)