中国神经再生研究(英文版) ›› 2019, Vol. 14 ›› Issue (11): 1941-1949.doi: 10.4103/1673-5374.259617
Chang-Xiang Li , Xue-Qian Wang , Fa-Feng Cheng, Xin Yan, Juan Luo, Qing-Guo Wang
摘要:
传统中医常使用牛黄治疗脑卒中,猪去氧胆酸是一种从牛黄中提取的生物活性物质,既往研究显示其联合胆酸、黄芩苷和栀子苷可抑制缺氧/复氧损伤中内质网应激介导的凋亡信号传导来减轻缺血性脑损伤,但是目前尚无研究关注单独猪去氧胆酸对缺血性脑卒中损伤的。由于缺血性脑卒中存在神经血管单元结构和功能方面的障碍,因而实验(1)以Transwell小室共培养来源于SD大鼠的脑微血管内皮细胞、神经元和星形胶质细胞成功构建了大脑皮质神经血管单元体外模型。(2)实验进一步研究了猪去氧胆酸对维持体外神经血管单元的剂量依赖性作用。为模拟体内缺血条件,将构建的神经血管单元体外模型以氧糖剥夺环境培养1h,并在。氧糖剥夺前以10.16或2.54 μg/mL猪去氧胆酸干预24h。(3)以CCK-8测定细胞活性,以流式细胞术分析细胞凋亡,以TUNEL分析细胞凋亡率,以ELISA检测炎性细胞因子白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α以及神经营养因子脑源性神经营养因子和胶质细胞源性神经营养因子的表达水平,使用试剂盒检测氧化应激损伤相关因子超氧化物岐化酶、一氧化氮、丙二醛和γ-谷氨酰转肽酶的活性。(4)结果显示猪去氧胆酸预处理能显著减少血脑屏障的通透性和神经细胞的凋亡,明显增加跨内皮电阻和γ-谷氨酰转肽酶的活性,减轻氧化应激损伤,减少炎性细胞因子的释放,增加脑源性神经营养因子和胶质细胞源性神经营养因子的表达;(5)结果表明猪去氧胆酸可通过调节炎症、氧化应激、细胞凋亡和神经营养因子的表达来影响氧糖剥夺损伤神经血管单元体外模型的完整性,具有在临床上治疗缺血性脑卒中的潜力。实验于2016年4月经北京中医药大学实验动物伦理委员会批准,批准号BUCM-3-2016040201-2003。
orcid: 0000-0003-2752-1925(Qing-Guo Wang) 0000-0002-3409-1196(Fa-Feng Cheng)