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1. 国内外研究状况的微观分析：

国外研究现状：在世界范围内多发性硬化发病率不断提高，其病因复杂，与遗传、病毒感染和环境等诸多因素有关，病理特征是免疫炎症引起的脱髓鞘和轴突损伤。治疗上主要采用激素及免疫抑制剂治疗，早期用药多能缓解，但绝大多数患者在激素减量或停药时病情复发，致使部分患者长期不能停用激素，但激素等免疫药物对患者的毒副作用明显。研究发现多发性硬化的主要病理特征是炎症引起的脱髓鞘和轴突损伤，特别是在早期就发生的轴突变性及神经元损伤，是多发性硬化患者神经功能障碍的重要原因。因此，众多学者围绕控制免疫炎症以减轻对髓鞘和轴突的损伤进行了大量研究。

国内研究状况：以往认为欧美国家多发性硬化发病率较高，近年来随着认识水平的提高及MRI等技术的广泛应用，中国报道的多发性硬化病例数量呈明显上升趋势。由于多发性硬化病因及病理机制复杂，迄今无系统而有效的治疗方法，目前国内主要采用激素、免疫抑制剂和β干扰素治疗，但上述治疗方法不良反应大且复发率高。近年来中医药对多发性硬化的研究取得了一定进展，中医或中西医结合治疗多发性硬化逐渐显示出了其优越性。最近学者对中药治疗多发性硬化进行了系统综述和meta分析，发现中医药能改善多发性硬化患者神经功能缺损，降低复发率，改善临床症状及免疫指标，减轻激素的副作用等。

补肾益髓胶囊（原称为二黄胶囊）是北京天坛医院樊永平教授经过多年临床实践创立的治疗多发性硬化的有效方剂，具有补肾化痰活血的作用。前期临床研究证明，多发性硬化急性发作期在常规治疗的基础上结合使用本方，能有效改善患者神经症状，减少激素副作用，促进患者康复，缓解期坚持服用半年及以上，能够减少复发，保护轴索，延缓疾病进展。前期的实验研究发现，补肾益髓胶囊对实验性变态反应性脑脊髓炎动物脑和脊髓中神经胶质纤维酸性蛋白、少突胶质细胞转录因子2及血清髓鞘碱性蛋白等均具有调节作用，可减轻实验性变态反应性脑脊髓炎的发病程度，抑制脑和脊髓的炎症反应和脱髓鞘改变，有利于神经的再生修复。

2. 文章创新性的分析：

对CNKI，PUBMED进行检索，检索时间2010-06-10/2013-06-10，检索关键词为多发性硬化，实验性自身免疫性脑脊髓炎，淀粉样前体蛋白，微管相关蛋白2。

全世界多发性硬化患者发病率逐年增多趋势，由于其病因及发病机制十分复杂，治疗也无安全有效的方法。国际上常用激素及免疫抑制治疗，但不能有效控制其反复发作，且长期大量使用，副作用明显。近年来中医药对多发性硬化的研究取得了一定进展，中医或中西医结合治疗多发性硬化在改善患者神经症状，预防复发，延缓病程，促进神经功能恢复及减轻激素副作用等方面具有明显优势。实验选用50 µg MOG35-55免疫C57BL/6小鼠诱导实验性变态反应性脑脊髓炎模型，为确定模型及其抗原剂量提供参考。实验重点观察补肾益髓胶囊对实验性变态反应性脑脊髓炎模型小鼠体质量、神经功能评分、发病率、死亡率、潜伏期、病程的影响及淀粉样前体蛋白与微管相关蛋白2在实验性变态反应性脑脊髓炎模型小鼠脑和脊髓组织中不同时间的表达规律。国内外对此少有报道。

3. 区别于他人他篇的特点：

实验采用皮下背部注射MOG35-55免疫C57BL/6小鼠，制备实验性变态反应性脑脊髓炎模型，免疫剂量和文献报道有所不同（其他研究使用MOG的剂量是100-300µg；作者仅使用50µg），并给于实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠激素和补肾益髓胶囊灌胃治疗，1次/d，共40d。补肾益髓胶囊是作者所在课题组研发的有效方剂，能有效地改善实验性变态反应性脑脊髓炎动物的临床症状，降低其神经功能评分，有减少发病率及死亡率，延长潜伏期，缩短病程的趋势，减轻髓鞘和轴突的损伤。并在促进其再生修复作用方面有优势，不同于其他文献局限于免疫调节方面的报道。

4. 外审专家意见及作者答复：

问题1：模型制备中为何选择C57BL/6小鼠为

实验对象？相关文献表明小鼠相较于大鼠更适于该动物实验模型，但不同品系的小鼠间对免疫造模存在敏感性差异。C57BL系小鼠仅能发生轻微的脱髓鞘病变，并不能成为经典的实验性变态反应性脑脊髓炎模型实验动物。

答复：C57BL/6小鼠为诱导主动免疫性-慢性非缓解型实验性变态反应性脑脊髓炎模型的经典模型。

问题2：以作者的处理方法来看目的是研究补肾益髓胶囊对实验性变态反应性脑脊髓炎动物轴突损害的预防和保护作用，但阳性对照组给药时间却和实验组不一致，这样的设计是否具有对照性？

答复：在实验研究中补药肾益髓方是在造模之后开始用，是考虑到中药起效慢，达到血药浓度的时间长；激素是在造模成功开始用药，是考虑西药起效快，达到血药浓度的时间短。参考其他实验研究中，也有类似报道。

问题3：急性期和缓解期的时间依据？如何解释急性期/缓解期与实验观察日期不一致。

答复：急性期和缓解期指的是小鼠发病的状态的时间段，不是具体的某个时间点，急性期（免疫第13-22天），缓解期是（免疫第23-40天）。

问题4：补肾益髓胶囊动物实验剂量的选择依据？

答复：参照徐叔云主编《药理实验方法学》202-204页，人民卫生出版社出版。计算公式公斤体质量剂量（mg/kg）dB= dA×RB/RA×（WA/WB）1/3,其中 dB和dA是小鼠和人的剂量， WA和WB是人和小鼠的体质量，RB和RA是人和小鼠的体型系数；这样换算是中剂量，在在此基础上增加或减少2倍即为高剂量和低剂量。

问题5：如何解释实验结果与剂量无相关性？

答复：从神经功能评分及体质量等相关药理学指标来看，药物中剂量（相当于临床人用剂量）的疗效较低剂量和高剂量好，其可能原因有：动物发病后胃肠道吸收不好，药物浓度过高（高剂量）药物较稠厚，反而会对胃肠道有一定刺激作用，因此药理作用反而不如中剂量好。但如果剂量减小（低剂量）则达不到有效血药浓度，因此本课题后续研究重点观察了中剂量治疗组的药理作用。