泛死亡是一种新发现的调节性细胞死亡类型，包括焦亡、凋亡和程序性坏死三种表型，这些类型的细胞死亡在感染性和炎症性疾病的病理生理过程中同时发生。虽然作者既往基于文献证据挖掘的研究显示泛死亡可能发生在神经缺血再灌注损伤中，但关于泛死亡是否存在的实验研究仍几乎未见。研究采用体外和体内视网膜神经元缺血再灌注损伤模型，研究视网膜缺血再灌注损伤中是否存在类似泛死亡的细胞死亡（同时发生焦亡、凋亡和程序性坏死）。结果显示，在体外和体内，缺血再灌注损伤从形态学特征到基因水平都诱发了视网膜神经元的泛死亡样细胞死亡。而且缺血再灌注损伤条件下，泛死亡的重要成分（caspase-1，caspase-8和NLRP3）的表达也明显上调。这些结果表明，视网膜神经元缺血再灌注损伤中存在泛死亡样细胞死亡；该研究为今后研究视网膜神经元的泛死亡提供了初步实验线索。
https://orcid.org/0000-0002-3103-6028 (Kun Xiong); https://orcid.org/0000-0001-6300-6491 (Qi Zhang); https://orcid.org/0000-0002-2561-9673 (Wei-Tao Yan); https://orcid.org/0000-0002-3616-5347 (Wen-Juan Zhao)
视网膜色素变性是一种以光感受器变性为特征的视网膜疾病，一般认为目前尚无有效的治疗方法。叶黄素联合其他抗氧化剂具有保护退化视网膜的潜力，但单独叶黄素对视网膜色素变性的作用人们仍不清楚。实验给予出生后第17至25天（当视杆细胞凋亡达到峰值时的时间）视网膜色素变性感光细胞变性模型Pde6b rd10小鼠灌胃叶黄素。结果发现，与溶剂干预的对照Pde6b rd10小鼠相比，叶黄素能显著促进光感受器的存活，且最佳保护剂量为200 mg/kg。进一步以这个剂量干预Pde6b rd10小鼠后发现，在结构上，叶黄素增加了Pde6b rd10小鼠的视杆细胞中视紫质的表达和视锥细胞中的视蛋白表达，提高了感光细胞的存活率；在功能上，叶黄素改善了Pde6b rd10小鼠的视觉行为、视敏度以及视网膜电流图反应；在机制上，叶黄素通过降低Müller胶质细胞中神经胶质纤维酸性蛋白的表达，抑制了视网膜中的反应性胶质增生，从而达到抗炎作用。因此，我们的结果证明了叶黄素可通过减少视网膜 Müller神经胶质增生以及抗炎作用延缓了视网膜色素变性中光感受器的退化。实验于2018年12月17日经暨南大学实验动物伦理委员会批准（批准号LACUC-20181217-02）。
https://orcid.org/0000-0003-4039-4246 (Kwok-Fai So); https://orcid.org/0000-0001-6703-9573 (Jian-Su Chen); https://orcid.org/0000-0002-7503-3996 (Hui-Jun Zhang); https://orcid.org/0000-0002-9987-2057 (Ying Xu); https://orcid.org/0000-0001-9146-1715 (Xue-Song Mi); https://orcid.org/0000-0003-2737-6780 (Shi-Bo Tang)
纤维肌痛(FM)表现为持续的感觉减退，包括躯体和情绪功能障碍、抑郁和焦虑；虽然FM的病因尚不清楚，但生物胺的显著减少是其重要的发病机制。为了解多巴胺能D3/D2受体在纤维肌痛过程中的作用，实验建立了利血平诱导纤维肌痛小鼠模型，然后对该模型小鼠进行腹腔注射多巴胺能D3/D2受体激动剂普拉克索。结果显示，普拉克索（PPX）可抑制利血平引起的机械性痛觉和热敏感性升高，表现为普拉克索减少了模型小鼠强迫游泳试验和溅水试验中的不动时间和增加了梳理次数；且接受普拉克索可减轻模型小鼠焦虑状态，表现为其在高架十字迷宫开放臂中停留的时间延长。普拉克索还可恢复利血平下调的额叶皮质和脊髓组织的多巴胺水平。普拉克索治疗可抑制脊髓组织氧化剂DCFH(2′,7′-二氯二氢荧光素)和亚硝酸盐的产生，并上调超氧化物歧化酶的活性。实验结果表明，多巴胺能D3/D2受体激动剂能够减轻纤维肌痛模型小鼠的疼痛和情绪功能障碍，其途径可能涉及恢复复中枢神经系统抗氧化能力。
https://orcid.org/0000-0002-6938-2161 (Rafael Cypriano Dutra)
视网膜退行性疾病的发病常与神经元缺失有关，因而，如何再生新的神经元以恢复视力已成为一个重要问题。NeuroD1是一种神经转录因子，能够在体内将脑星形胶质细胞重编程为神经元。此次实验证明了NeuroD1可将视网膜中的主要神经胶质细胞Müller细胞重编程为成年小鼠的视网膜神经元。最引人注目的是，相同转录因子NeuroD1以2种不同病毒载体的异位表达可将Müller胞转分化为不同的细胞。具体来说，AAV7m8 GFAP681::GFP-ND1可将Müller细胞转分化为视网膜内核层神经元，包括无长突细胞和一些神经节细胞。而AAV9 GFAP104::ND1-GFP则可将Müller细胞转分化为视网膜外核层神经元，即感光细胞和少数水平细胞，且具有更高的转换效率。此外研究还证明了由AAV9 GFAP104::ND1-GFP诱导的Müller细胞的转分化表现出明显的剂量依赖性和时间依赖性。上述结果表明，成年小鼠的Müller细胞具有高度可塑性，可重新编程为多种视网膜的神经元亚型。
https://orcid.org/0000-0002-7840-9047 (Di Xu);
https://orcid.org/0000-0002-1857-3670 (Gong Chen);
https://orcid.org/0000-0002-9987-2057 (Ying Xu)
OTX2是视网膜中表达的一种同源蛋白转录因子，以前的研究表明，外源OTX2可促进视网膜损伤后神经节细胞的体外和体内存活率。实验量化了OTX2体外和体内对成体视网膜神经节细胞轴突再生的影响。结果表明，外源性OTX2刺激离体成体视网膜细胞培养物和成体视网膜组织外植体中视网膜神经节细胞的轴突再生，并且在成年大鼠视网膜神经节细胞的培养物中观察到视网膜神经节细胞对OTX2产生直接反应，OTX2对视神经压迫后14天内直至视交叉的再生轴突数量具有积极作用，OTX2对视网膜神经节细胞存活和再生的作用对于影响这种细胞类型的退行性疾病具有潜在的意义。
https://orcid.org/0000-0002-7598-6180 (Raoul Torero Ibad)
木犀草素减缓遗传性视网膜色素变性小鼠视网膜感光细胞的变性
既往研究显示，木犀草素对氧化损伤的视网膜神经节细胞和视网膜色素上皮细胞有神经保护作用，且可抑制小胶质细胞的神经毒性损伤，因而具有治疗视网膜疾病的潜力。实验以一种缓慢的视网膜色素变性感光受体变性模型转基因小鼠（rd10小鼠）为对象，拟探索木犀草素是否对其视杆细胞有保护作用。（1）rd10小鼠出生后14-25d时腹腔注射木犀草素（100 mg/kg），见木犀草素明显改善了rd10小鼠视觉表现和视网膜光反应，且还能提高感光细胞的存活率，缓解了视网膜结构的变化；（2）木犀草素能减轻活性氧生成，感光细胞凋亡，抑制反应性神经胶质增生，增加抗炎细胞因子的mRNA水平，同时降低促炎和趋化因子的mRNA水平，以及降低磷酸化JNK/JNK比值；（3）给予rd10小鼠腹腔注射JNK抑制剂SP600125产生与木犀草素相似的保护作用，提示木犀草素可能通过抑制JNK通路调节rd10小鼠视网膜氧化和炎症反应，从而延缓其光感受器变性和视神经功能的退化，可能成为视网膜色素变性的辅助药物。实验于2018年7月17日经暨南大学动物伦理委员会批准（批准号IACUC-20181217-02）。
https://orcid.org/0000-0002-9987-2057 (Ying Xu); https://orcid.org/0000-0002-9886-4880 (Ang Li)
小胶质细胞极化和神经炎症在视网膜变性中起着重要作用。为了解小胶质细胞极化在青光眼进展中的功能，并确定减轻视网膜神经炎症的策略。研究分为2组平行实验，一组实验为在C57BL/6小鼠中诱发了视网膜缺血再灌注损伤。另一组实验为给予视网膜缺血再灌注损伤小鼠玻璃体内注射白细胞介素4或对照溶媒。通过计数视网膜平板上的RBPMS阳性细胞来评估视网膜神经节细胞的损失，并通过定量RT-PCR、免疫荧光和免疫印迹来评估M1和M2小胶质细胞标记物的表达。结果显示，在视网膜缺血再灌注后的28d内，视网膜神经节细胞逐渐丧失，伴随着后期M2小胶质细胞的持续减少。白细胞介素4在所有时间点都在视网膜中检测不到，而玻璃体内白细胞介素4的给药极大地改善了M2小胶质细胞的标记表达，并减少了视网膜缺血再灌注后晚期视网膜神经节细胞的损失。实验表明，白细胞介素4治疗延长了视网膜缺血再灌注后M2小胶质细胞的高数量，以促进视网膜神经节细胞的生存。
https://orcid.org/0000-0002-9379-1301 (Li Xu); https://orcid.org/0000-0002-0723-6353 (Di Chen)
脂肪间充质干细胞对谷氨酸诱导的兴奋性毒性损伤有保护作用，但间充质干细胞治疗视神经损伤仍存在局限。研究发现，脂肪间充质干细胞旁分泌的细胞外囊泡，具有脂肪间充质干细胞功能的同时，还拥有非免疫原性、低概率异常生长和易到达目标细胞的独特优势。实验发现，玻璃体内注射人脂肪间充质干细胞来源细胞外囊泡可显著减轻谷氨酸诱导的大鼠视网膜形态和视网膜电图损害。此外，在谷氨酸损伤前，以脂肪间充质干细胞来源细胞外囊泡干预R28细胞，可抑制细胞内钙浓度的增加，减少AMPA受体A2亚型（GluA2）的表达及磷酸化，抑制蛋白激酶C-α激活。且蛋白激酶C-α激动剂12-O-十四烷酰基激素13乙酸酯（TPA）可抑制脂肪间充质干细胞来源的细胞外囊泡对谷氨酸损伤R28细胞的保护作用。上述发现表明，脂肪间充质干细胞来源的细胞外囊泡能缓解谷氨酸诱导的视网膜兴奋性神经毒性损伤，且其作用与抑制蛋白激酶C-α激活有关。
https://orcid.org/0000-0002-9161-1055 (Ju-Fang Huang); https://orcid.org/0000-0001-6654-8114 (Tian-Qi Duan)
中枢神经系统轴突再生是一个高能耗过程。与哺乳动物相比，成年斑马鱼神经元损伤后具备恢复功能；相应地，斑马鱼是如何应对这种高能量需求的呢？作者既往表明，成年斑马鱼视神经挤压后，存在拮抗的轴突-树突相互作用，其中 RGC 树突的回缩是有效轴突修复的先决条件。假设“再生树突”范式可能与神经元内线粒体重排有关，因为神经节细胞可能没有足够的资源来同时维持树突和恢复轴突。实验描述了再生过程中不同神经节细胞区室（树突、胞体和轴突）内的线粒体分布和线粒体动力学。视神经挤压导致树突回缩期间树突中的线粒体减少，随后在轴突再生期间视神经/束中出现线粒体增大。视网膜神经元树突再生后，视网膜树突内的线粒体密度恢复到基线水平。此外，在视神经损伤后，在视网膜神经节细胞胞体中观察到线粒体分裂和生物合成的短暂增加。以上研究结果表明，在视神经损伤诱导的再生过程中，线粒体从树突转移到轴突并再次返回，暂时的线粒体动力学变化支持视神经挤压后轴突和树突的依次再生。
https://orcid.org/0000-0003-0186-1411 (Lieve Moons)
研究已证实，乙酰牛磺酸镁（MgAT）对N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）诱导的视网膜细胞凋亡具有保护作用，其机制尚不明晰。为此，（1）实验将SD大鼠随机分为3组：对照组，接受玻璃体内注射媒介物；N-甲基-D-天冬氨酸组，接受玻璃体内注射N-甲基-D-天冬氨酸；N-甲基-D-天冬氨酸+乙酰牛磺酸镁组，接受玻璃体内注射N-甲基-D-天冬氨酸前进行乙酰牛磺酸镁预处理；（2）注射后7天，使用荧光金和BRN3A免疫染色的逆行标记检测了视网膜神经节细胞的存活率。使用视网膜电图（ERG）评估视网膜损伤后的功能，并评估核因子κB，p53和AP-1家族成员（c-Jun/c-Fos）在视网膜的基因表达。反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹检测和评估视网膜磷酸化核因子κB，磷酸化p53和AP-1水平。使用视觉对象识别测试（ORT）评估大鼠的视觉功能。逆行标记和BRN3A免疫染色检测；（3）结果均显示，与N-甲基-D-天冬氨酸组相比，N-甲基-D-天冬氨酸+乙酰牛磺酸镁的组中视网膜神经节细胞的数量明显增加；视网膜电图评估结果表明，用乙酰牛磺酸镁进行预处理可以部分保留N-甲基-D-天冬氨酸暴露的视网膜的功能活性；乙酰牛磺酸镁抑制了N-甲基-D-天冬氨酸诱导的视网膜磷酸化核因子κB、磷酸化p53和AP-1水平的增加，并抑制了N-甲基-D-天冬氨酸诱导的核因子κB、p53和AP-1家族成员的转录活性（c-Jun / c-Fos） ；两种视觉对象识别测试结果也显示了乙酰牛磺酸镁改善N-甲基-D-天冬氨酸暴露后识别视觉线索（即具有不同形状的物体）的困难；表明通过乙酰牛磺酸镁预处理，下调核因子κB，p53和AP-1介导的c-Jun/c-Fos的转录活性来抑制N-甲基-D-天冬氨酸诱导的神经元凋亡，从而预防N-甲基-D-天冬氨酸诱导的视网膜损伤，保留大鼠的视觉功能。
https://orcid.org/https://orcid.org/0000-0002-2852-8486 (Igor Iezhitsa)
槲皮素是一种常见的类黄酮，具有在抗癌、改善记忆力和心血管疾病的功能，但其对糖尿病性视网膜病是否有治疗作用尚有待研究。实验通过链脲佐菌素诱导建立糖尿病性视网膜病大鼠模型，造模后72h，连续16周腹腔注射槲皮素150 mg/kg。结果发现槲皮素可明显增加高血糖引起视网膜细胞层厚度，增加视网膜神经节细胞数量，降低视网膜组织中促炎因子白细胞介素1β、白细胞介素18、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的过表达，以及视网膜中高迁移率族蛋白B1过表达和NLRP3炎性小体过度激活，并抑制TLR4和NF-κBp65的过表达，并促进促血管生成的血管内皮生长因子和可溶性细胞间黏附分子1以及神经营养相关的脑源性神经营养因子和神经生长因子的表达。而腹腔注射血红素加氧酶1抑制剂Znpp则逆转槲皮素的保护作用。表明槲皮素对糖尿病性视网膜病具有治疗作用，其作用可能与诱导血红素加氧酶1表达有关。实验于2016年4月8日经中国医科大学伦理委员会批准，批准号2016PS229K。
https://orcid.org/0000-0001-7653-7515 (Xiao-Long Chen)
色素性视网膜炎（RP）与氧化应激，自噬和炎症有关。表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是绿茶叶中最丰富的基于儿茶素的类黄酮，已被证实对缺血性视网膜病变有保护作用。为了解EGCG是否对色素性视网膜炎有治疗作用，将白化病P23H大鼠与有色的Long Evans大鼠杂交，以产生具有色素性视网膜炎临床特征的后代。从P100到P160，每周通过腹腔注射盐水或EGCG 25 mg/kg干预色素性视网膜炎模型大鼠，然后与野生型Long Evans大鼠进行比较。EGCG治疗的大鼠表现出更好的视觉和视网膜电生理功能，对比敏感度和b波值增加；肝脂质过氧化作用减少，总抗氧化能力以及过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性增加。说明EGCG不仅减少了色素性视网膜炎大鼠视觉功能的丧失，而且还提高了组织抗氧化水平。
https://orcid.org/0000-0003-2656-6750 (Lorena Fuentes-Broto)
目前临床上主要采用甲基强的松龙冲击方法治疗视神经炎，其可加速视力恢复，但不能改善长期视力预后。最近有研究发现，miR-125a-5p对自身免疫性疾病具有免疫调节作用，但其对视神经炎是否也发挥作用尚不可知。实验以腺相关病毒转染过表达或沉默小鼠的miR-125a-5p，发现沉默miR-125a-5p会延长视觉诱发电位的潜伏期以及加重视神经的炎症；而miR-125a-5p过表达则可抑制视神经的炎症，保护视网膜神经节细胞并增加调节性T细胞的比例。表明miR-125a-5p可通过促进调节性T细胞的分化而发挥抗炎作用。
https://orcid.org/0000-0002-0632-0182 (Wen-Jing Luo); https://orcid.org/0000-0003-4879-5159 (Yi Du)
成功建立视网膜神经节细胞和大脑中视网膜受体区域之间的重新连接是评估视神经再生的关键。然而，由于脑组织不是透明的，因此观察视网膜受体区域的形态并不容易。实验创新性地结合了组织透明化技术和逆向跨突触病毒示踪技术观察小鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞的脑内视网膜投射区域的变化。光片显微镜对透明化处理后的全脑组织进行成像，结果发现伪狂犬病毒(PRV724)主要感染视网膜神经节细胞，并可在透明化大脑中逆行示踪视网膜受体区域，同时PRV724示踪的神经元比同类研究更广泛。同时发现，视神经损伤可选择性减少PRV724标记的视网膜神经节细胞在下丘脑室旁核、膝状叶间核、腹侧外侧膝状核、杏仁核中央、杏仁核基底外侧、Edinger-Westphal核和动眼神经核的投射，而不影响前庭上核、红核、蓝斑、巨细胞网状核和面神经核的投射。这一结果提示，组织透明化技术联合逆向跨突触病毒示踪技术可更客观和整体的评估小鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞的脑内视网膜投射区域的变化，这为评估视神经损伤和再生提供了一种可行的方法。
http://orcid.org/0000-0002-3938-7164 (Min-Bin Yu);
http://orcid.org/0000-0001-7615-5648 (Yu-Qing Lan);
https://orcid.org/0000-0002-6621-1172 (Zong-Yi Zhan); http://orcid.org/0000-0002-3761-6111 (Zi-Jing Li);
https://orcid.org/0000-0002-8443-4740 (Di-Fang Sun);
http://orcid.org/0000-0002-3449-1843 (Ya-Li Wu); http://orcid.org/0000-0002-8170-0265 (Zi-Tian Liu);
http://orcid.org/0000-0003-3606-683X (Kai-Li Wu)
转录因子Sox11可在脊椎动物视网膜发育过程中起重要作用，但其在视网膜再生中的作用仍然难以捉摸。此次实验发现针刺斑马鱼的机械性视网膜损伤，可诱导增殖的Müller胶质源性祖细胞中Sox11同源物 Sox11b的表达。（1）Sox11b 敲低虽不影响损伤后4 d时的Müller胶质源性祖细胞的增殖，但会改变后者的核形态和径向迁移。Sox11b敲低会导致损伤后7 d时视网膜内层 Müller胶质源性祖细胞比例增加，外核层Müller胶质源性祖细胞比例降低。因此，Sox11b敲低可减少光感受器再生，而再生后的无长突和神经节细胞增多。（2）定量聚合酶链式反应进一步发现Sox11b可调节视网膜中Notch信号因子的表达，而抑制Notch可部分复制Sox11b敲低的表型，提示Notch是其下游通路。（3）实验结果显示Sox11b可在斑马鱼视网膜再生过程中Müller胶质源性祖细胞迁移和命运决定中起作用，这可能对未来的哺乳动物视网膜修复具有深入研究探讨其价值的意义。
https://orcid.org/0000-0003-0782-4160 (Hui Xu); https://orcid.org/0000-0003-0547-0450 (Jianfeng Lu)
细胞凋亡是程序性细胞死亡的关键机制，是由caspase-3蛋白触发的，通过基因治疗降低其水平可以减少中枢神经系统损伤后的细胞死亡。实验开发了一种新颖的非病毒基因疗法，通过使用聚氰基丙烯酸丁酯纳米颗粒（CaspNPs）传递小干扰RNA（siRNA）来阻断caspase-3基因表达。在体外，CaspNPs明显阻断了C6细胞中caspase-3蛋白的表达；CaspNPs眼内注射使视神经挤压伤大鼠中使视网膜capsase-3免疫荧光强度降低了57.9%。使用共聚焦神经成像对视网膜神经节细胞进行纵向重复计数，结果显示眼内注射CaspNPs后创伤细胞仅损失36.1%。因为用siRNA纳米粒子进行非病毒基因治疗可以选择性沉默caspace-3基因的表达并阻断有丝分裂后神经元的凋亡，所以用纳米粒子进行siRNA传递可能有望为促进中枢视觉系统损伤和其他神经系统疾病恢复的有效措施。
https://orcid.org/0000-0002-4472-5543 (Bernhard A. Sabel)
https://orcid.org/0000-0002-2279-6885 (Zhong-Feng Wang); https://orcid.org/0000-0002-4440-1389 (Xing-Huai Sun)
运动终板是运动神经元和骨骼肌进行信息交换的重要场所，在肌肉中以薄片形式分布。周围神经损伤后延期修复常由于运动终板变性而导致功能恢复效果不佳。实验横断小鼠胫神经，并在损伤后即刻、1个月以及3个月以可生物降解甲壳素导管桥接进行修复。通过活体小鼠尾静脉注射银环蛇毒素结合组织光透明技术，可见延期1或3个月修复小鼠骨骼肌中的运动终板依然呈现原有的片层状分布，但随着失神经时间延长，腓肠肌中运动终板的数量、每个薄片簇中运动终板数量和单个运动终板的成熟度逐渐降低，随着延期修复时间的延长单个运动终板的成熟度以及骨骼肌运动终板的总数均出现显著下降。表明延迟修复虽可恢复运动终板的空间分布，但对其均质性和数量方面存在不利影响。实验于2019年4月8日经北京大学人民医院伦理委员会批准（批准号2019PHC015）。
https://orcid.org/0000-0001-9932-642X (Xiao-Feng Yin): https://orcid.org/0000-0002-6678-216X (Xue-Feng Zhou)
中枢胰岛素抵抗即大脑细胞对胰岛素的敏感性减弱，其涉及各种神经退行性疾病，如糖尿病和阿尔茨海默病；然而，中枢胰岛素抵抗是否以及如何在眼睛中起作用仍不清楚。在此，实验给予成年Wistar大鼠侧脑室内注射胰岛素受体拮抗剂S961(实验组)，以测试中枢胰岛素抵抗是否会导致眼部结构的病理变化，并设注射缓冲液为对照组；然后对血液样本、眼压、小梁网形态、睫状体标志物、视网膜和视神经完整性以及全基因组表达模式进行评估。虽然实验组和对照组的血糖和血清胰岛素水平都没有明显改变，但注射S961在第1次注射后的14和24天，眼压明显增加，同时小梁网的孔隙率和aquaporin 4表达减少，睫状体的肿瘤坏死因子α和水通道蛋白4表达增加。注射S961后，视网膜神经节细胞层的细胞密度和胰岛素受体表达减少。眼底摄影显示，实验组的毛细血管周围萎缩，血管调节失调。这些视网膜变化伴随着促炎和促凋亡基因表达的上调，抗炎、抗凋亡和神经营养基因表达的下调，以及参与胰岛素信号基因表达的失调。视神经组织学检测结果显示，小胶质细胞被激活，胶质纤维酸性蛋白、肿瘤坏死因子α和水通道蛋白4的表达发生变化。 视网膜的分子通路结构显示，涉及的3个最重要的通路是炎症/细胞应激、胰岛素信号和与神经退行性有关的细胞外基质调节。胰岛素信号传导失调和炎症相关基因之间也存在着多模式的串联。以上结果表明，阻断中枢神经系统的胰岛素受体信号传导可导致小梁网和睫状体功能障碍、眼压升高，以及视网膜和视神经的炎症、胶质激活和凋亡。鉴于中央胰岛素抵抗会导致视觉系统的神经退行性表型，胰岛素信号传导通路可能为涉及视网膜和视神经的视觉疾病的治疗带来希望。
https://orcid.org/0000-0002-3111-396X (Tanuj Dada); https://orcid.org/0000-0003-4012-7084 (Kevin C. Chan)
眼钝挫伤后视网膜损伤可能直接影响预后，并导致视力丧失。为研究眼钝挫伤后视网膜损伤的病理变化和分子机制，实验建立了自由落体打击比格犬眼钝挫伤模型，以苏木精-伊红染色、免疫荧光染色、western blot和TUNEL法观察损伤后14d内视网膜的变化。结果发现：（1）与对照组相比，眼钝挫伤后14d内，视网膜节细胞的数量随时间逐渐减少，内核层和外核层的厚度也逐渐减少。内核层中双极细胞在损伤后第1天即开始减少，而内核层中的胆碱能细胞和无长突细胞的数量直到第7天才减少，且损伤后视网膜细胞的坏死量随时间增加，也从外核层向内核层发展。（2）视觉电生理学结果表明，视觉障碍从损伤后第1天开始，并随着时间的推移而加重。（3）此外，眼钝挫伤不仅可诱导视网膜Müller细胞的神经再生和胶质增生，还可导致小胶质细胞向视网膜募集和极化为M1表型。（4）这些数据说明，坏死性凋亡在眼钝挫伤后可通过胶质增生和神经炎症加重视网膜损伤中起重要作用，可能给予更多研究者发现与之相关的潜在的治疗策略提供实验数据。
https://orcid.org/0000-0001-6194-5663 (Fei Fei); https://orcid.org/0000-0003-3276-6345 (Zhou Fei)
抑制视网膜新生血管形成是视网膜相关疾病治疗的主要策略，但尚无有效的治疗方法。piRNA是一种小的非编码RNA，可通过与PIWI样蛋白的相互作用参与多种生命活动。实验首先发现缺氧环境培养的人视网膜内皮细胞中piR-1245及其相互作用的蛋白PIWIL2的表达明显增加，且细胞凋亡、迁移、管形成以及增殖能力明显增强，而敲除细胞中的piR-1245，则会抑制上述现象。进而以p-JAK2 激活剂进行干预，发现piR-1245是通过JAK2/STAT3通路影响缺氧诱导因子 1α和血管内皮生长因子表达而实现的。进一步体内实验中，将7d龄新生小鼠于75 ± 2%高氧环境中饲养5d，而后敲低视网膜中的piR-1245。结果发现视网膜新生血管数量减少，炎症相关蛋白表达被抑制，视网膜细胞凋亡减少， JAK2/STAT3通路受到抑制，缺氧诱导因子 1α和血管内皮生长因子表达降低。在玻璃体腔注射JAK2抑制剂JAK2/TYK2-IN-1 也可抑制小鼠视网膜新生血管，并诱导JAK2/STAT3通路蛋白以及缺氧诱导因子 1α和血管内皮生长因子的低表达。上述发现表明piR-1245可激活 JAK2/STAT3 通路并调节缺氧诱导因子 1α和血管内皮生长因子表达，进而促进视网膜新生血管形成，因而可作为视网膜新生血管形成的新治疗靶点。
淀粉样β蛋白在青光眼患者视网膜中的改变与在阿尔茨海默病患者的大脑改变相似。脑源性神经营养因子（BDNF）的水平下降与淀粉样β蛋白（Aβ）的神经毒性作用有关。为了解脑源性神经营养因子对淀粉样β1-40蛋白（Aβ1-40）诱导的Sprague Dawley大鼠视网膜损伤的神经保护作用机制，实验随机给予大鼠玻璃体内注射磷酸盐缓冲溶液（对照）、Aβ1-40（5 nM）或Aβ1-40（5 nM）+脑源性神经营养因子（1 µg/mL）。结果显示：（1）玻璃体内注射Aβ1-40诱发了视网膜神经节细胞的凋亡。（2）荧光金染色显示Aβ1-40组的存活的视网膜神经节细胞数量明显低于对照组和脑源性神经营养因子干预组。在Aβ1-40组，视网膜神经节细胞数量减少与caspase-3的表达增加和TrkB和ERK1/2的表达减少有关。（3）脑源性神经营养因子抑制了Aβ1-40诱导的视网膜中caspase-3在基因和蛋白水平的表达增加，并上调了TrkB和ERK1/2的表达。这些结果表明，脑源性神经营养因子治疗可以通过激活BDNF-TrkB信号通路，减少视网膜神经节细胞凋亡，对Aβ1-40诱导视网膜损伤起到神经保护作用。
https://orcid.org/0000-0002-2852-8486 (Igor Iezhitsa)
已有研究证实，母体表达基因3（MEG3）对糖尿病视网膜病变的保护作用，但其对早产儿视网膜病变后血管新生的作用尚不确定。实验由此拟观察母体表达基因3过表达对氧诱导早产儿视网膜病变小鼠模型视网膜血管新生的作用。结果显示，母体表达基因3过表达可明显抑制早产儿视网膜病变后视网膜血管新生，该作用可能是通过下调PI3K,Akt和血管内皮生长因子及促炎症因子的表达实现的，因而以母体表达基因3为靶点的干预有望成为未来临床治疗早产儿视网膜病变的一种新方法。
https://orcid.org/0000-0003-4749-2084 (Qing-Zhu Nie)
鞘氨醇-1-磷酸受体(S1PR)信号调节着中枢神经系统(CNS)的各种病理生理过程，但其在神经退行性疾病中的作用在很大程度上仍未得到确认。西尼莫德是S1P1和S1P5受体的特异性调节剂，是治疗继发进展型多发性硬化的免疫抑制药物。为研究西尼莫德在体内对视网膜和大脑的神经保护特性，实验建立了由慢性眼压升高(IOP)或急性N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)兴奋性毒性诱发的视神经损伤模型。通过在Syn1启动子下表达AAV-PHP.eB-Cre重组酶使S1PR1flox/flox小鼠产生神经元特异性缺失，以确定S1PR1在神经元中的作用。视网膜电生理反应、视网膜和视神经的组织学和免疫荧光分析显示，在慢性和急性视神经损伤模型中，西尼莫德显示出明显的神经保护作用；同时，西尼莫德对视神经损伤引起的大脑高级视觉中心的跨神经元退行性变化也显示出明显的保护作用。西尼莫德干预还减少了小胶质细胞的激活和沿视觉通路的反应性胶质增生，明显地提高了视网膜和大脑中的神经保护性Akt和Erk1/2的激活。在慢性视神经损伤条件下, S1PR1在神经元中的特异性缺失会增强视网膜和背外侧膝状核(dLGN)的退行性变化，并削弱西尼莫德的保护作用。以上实验数据表明，西尼莫德通过S1PR1在中枢神经系统的神经元中发挥直接的神经保护作用,而不依赖于其外周的免疫调节作用。从而提示，神经元S1PR1是一个神经保护的干预标靶，西尼莫德对它的调节对于减轻青光眼病情有积极意义。
https://orcid.org/0000-0003-0997-0196 (Devaraj Basavarajappa); https://orcid.org/0000-0002-0202-7843 (Vivek Gupta)
视神经和视网膜神经节细胞在损伤后的自我修复能力有限。丙戊酸(VPA)是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂和多靶点药物，已被证明对视网膜神经元具有神经保护作用。此次实验建立视神经挤压伤大鼠模型后，立即在其玻璃体腔注射丙戊酸。以透射电镜评估视网膜神经节内质网超微结构时程变化；采用免疫组化和蛋白印迹检测发现丙戊酸可上调视神经挤压伤大鼠视网膜神经节中内质网应激标志分子葡萄糖调节蛋白78表达，并降低转录因子C/EBP同源蛋白、磷酸化真核细胞起始因子2α和caspase-12表达。提示丙戊酸可通过减弱内质网应激期间的真核细胞起始因子2α-C/EBP同源蛋白信号传导和caspase-12的活化，来减少视神经挤压伤后视网膜神经节细胞的凋亡，将为进一步明确丙戊酸的神经保护调控机制提出一个新的途径。
https://orcid.org/0000-0002-2781-7219 (Xu Hou)
骨桥蛋白（OPN）是一种细胞外基质蛋白与中枢神经系统的神经炎症调节有关。实验应用光受体视黄醇类结合蛋白(IRBP)对Lewis大鼠进行免疫,建立实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)模型，评估了骨桥蛋白在实验性自身免疫性葡萄膜炎中扮演的角色。结果显示，在自身免疫性葡萄膜炎大鼠模型的诱导阶段，大鼠眼部组织骨桥蛋白水平明显增加；骨桥蛋白配体CD44的水平在实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠睫状体中增加；大鼠视网膜激活的小胶质细胞/巨噬细胞和睫状体中可检测到骨桥蛋白。这些结果表明，骨桥蛋白是早期实验性自身免疫性葡萄膜炎的生物标志物。
https://orcid.org/0000-0002-9851-4354 (Taekyun Shin)
Rheb是一种能激活mTORC1的小GTPase。有研究显示，组成性活性Rheb可通过激活mTOR下游的蛋白质，增强脊髓损伤后感觉轴突的再生。S6K1和4E-BP1就是mTORC1下游的重要效应子。为了解Rheb/mTOR及其下游效应子S6K1和4E-BP1在视网膜神经节细胞保护中的作用，实验以腺病毒相关病毒介导组成性活性Rheb转染视神经挤压小鼠模型，观察其对视网膜神经节细胞存活和轴突再生的作用。结果可见，组成性活性Rheb过表达可有效促进损伤急性期（14d）和慢性期（21和42d）视网膜神经节细胞的存活，且显性负性S6K1突变体或组成性活性4E-BP1突变体与组成性活性Rheb共表达均能显著抑制视网膜神经节细胞轴突的再生，表明mTORC1介导的S6K1激活和4E-BP1抑制是组成性活性Rheb诱导轴突再生的必要因素。然而玻璃体内单独转染显性负性S6K1突变体或组成性活性4E-BP1突变体时，则只有S6K1激活而不是4E-BP1敲除才能诱导轴突再生。S6K1激活还能促进视网膜神经节细胞在损伤后14d时的存活，而4E-BP1敲低则意外地轻微抑制了视网膜神经节细胞的存活，组成性活性4E-BP1过表达也能促进视网膜神经节细胞的存活。与组成性活性Rheb单独表达相比，共表达组成性活性Rheb和组成性活性4E-BP1可显著提高视网膜神经节细胞的存活率。因此认为，4E-BP1和S6K1有神经保护作用，且4E-BP1可能至少部分独立于Rheb/mTOR通路发挥作用。上述结果提示，组成性活性Rheb可通过调节S6K1和4E-BP1活性促进视网膜神经节细胞的存活和轴突再生，且S6K1磷酸化（活化）和4E-BP1磷酸化（失活）可协同促进轴突再生，但在两者在视网膜神经节细胞存活中起拮抗作用。
https://orcid.org/0000-0001-6594-4019 (Bing Jiang)
间充质干细胞对视网膜和感光细胞的损伤具有神经保护作用，该作用可能地由间充质干细胞释放的细胞外囊泡（或称为外泌体）介导。为探索脐带间充质干细胞来源的细胞外囊泡对于青光眼的神经保护作用，实验以结膜成纤维细胞前房注射建立了慢性高眼压大鼠模型，以模拟青光眼视神经损伤。损伤1周后，于玻璃体腔注射脐带来源间充质干细胞来源的细胞外囊泡。结果可见间充质干细胞来源的细胞外囊泡可显著减轻视网膜损伤，增加视网膜神经节细胞数量，抑制视网膜凋亡相关蛋白caspase-3的活化。表明间充质干细胞来源的细胞外囊泡有助于减轻慢性高眼压视神经损伤，且这一作用是通过抑制细胞凋亡实现的。
https://orcid.org/0000-0002-5945-0124 (Ren-Yi Wu); https://orcid.org/0000-0003-4578-7401 (Yao Wang)
炎症是疾病或损伤后中枢神经系统中神经元存活的关键病理生理因素，但既往研究对巨噬细胞对神经元的作用机制尚不清楚。（1）实验将成年Fischer大鼠的视网膜与原代腹膜巨噬细胞或经酵母聚糖活化的腹膜巨噬细胞共培养7d；（2）免疫荧光分析表明，腹膜巨噬细胞可抑制视网膜外植体中的神经节细胞存活和神经突生长，并缩短再生神经突的长度。而向腹膜巨噬细胞中添加酵母聚糖，则能进一步减弱神经节细胞的存活和神经突的生长；（3）腹膜巨噬细胞培养基也可抑制神经节细胞的存活和神经突的生长，同时缩短再生神经突的长度，说明腹膜巨噬细胞的分泌物可介导腹膜巨噬细胞的抑制作用；（4）炎症和氧化相关基因表达的增加可能也与酵母聚糖激活引起的神经节细胞变性增强有关；（5）结果表明，原代腹腔巨噬细胞可减弱神经节细胞存活和神经突的再生，且其活化会进一步加剧神经节细胞的变性。实验于2014年3月11日经汕头大学汕头国际眼科中心和中国大学联合动物伦理委员会批准，批准号：EC 20140311（2）-P01。
https://orcid.org/0000-0003-3876-0606 (Ling-Ping Cen)
视力取决于从视网膜经视神经准确传导到大脑的信号，而视神经是由源自视网膜神经节细胞的轴突束所组成。哺乳动物视神经作为中枢神经系统的重要组成部分，一旦受伤就不能再生，从而造成永久性视力丧失。且到目前为止，尚无临床方法可再生视神经并恢复视力。由于作者团队既往研究发现，在视网膜视神经损伤后，内丛层囊泡中游离锌水平迅速增加，且螯合Zn2+可显著促进轴突再生。因此此次实验，分别在无长突细胞和视网膜神经节细胞中条件性敲除锌转运蛋白3构建了2种转基因小鼠（VGATCreZnT3fl/fl和VGLUT2CreZnT3fl/fl），得出视网膜中急剧升高的游离Zn2+来源于无长突细胞的直接证据。继而发现，在无长突细胞中选择性敲除锌转运蛋白3能够有效促进视神经钳夹伤后视网膜神经节细胞的存活以及视神经的再生，并能改善视网膜神经节细胞功能，促进视力恢复。对视网膜神经节细胞进行测序分析结果提示，抑制突触前Zn2+的释放能够影响突触后神经元视网膜神经节细胞内存活相关关键基因的转录，调节无长突细胞-视网膜神经节细胞突触间联系，从而影响视网膜神经节细胞的命运。上述结果显示，无长突细胞释放Zn2+可触发神经元视网膜神经节细胞中与神经元生长和存活相关的转录组变化，并影响视网膜网络的突触可塑性。这一结果使锌依赖性视网膜神经节细胞死亡的理论更加准确和完整，也为复杂的视网膜细胞网络间作用提供新的见解。
https://orcid.org/0000-0002-3483-7189 (Yiqing Li); https://orcid.org/0000-0003-3247-7199 (Yehong Zhuo)
